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Dihydrorhodamine 123
目录号 : SJ-MD0425 别名 : DHR 123 中文名称 : 二氢罗丹明123 促销产品 热销产品 纯度:99.72%

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 是一种非荧光活性氧 (ROS) 指示剂 (λex=488 nm,λem=525 nm)。Dihydrorhodamine 123 在细胞内存在活性氧物质的情况下被氧化为荧光试剂 Rhodamine 123,并定位于线粒体中。该产品在溶液状态不稳定,建议现用现配,并在短期内尽快用完。

CAS No. : 109244-58-8
SparkJade所售产品仅用于科学研究(非临床研究),不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
1 mg ¥  360.00
5 mg ¥  800.00
10 mg ¥  1200.00
25 mg ¥  2120.00
50 mg 咨询

SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
109244-58-8
分子式
C21H18N2O3
分子量
346.38
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年
储存注意事项
-20℃,粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。

生物活性

Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 是一种非荧光活性氧 (ROS) 指示剂 (λex=488 nm,λem=525 nm)。Dihydrorhodamine 123 在细胞内存在活性氧物质的情况下被氧化为荧光试剂 Rhodamine 123,并定位于线粒体中。该产品在溶液状态不稳定,建议现用现配,并在短期内尽快用完。

产品类别
染料/荧光试剂
体外研究 (In Vitro)

在 10 μM Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 存在下,添加 50 nM 的 phorbol 12-myristate 13-acetat (PMA) 刺激中性粒细胞 NADPH 氧化酶,导致罗丹明生成速率增加。在 10 μM Dihydrorhodamine 123 的作用下,细胞的荧光强度随添加 50 nM PMA 的时间增加而增加。在10 μM Dihydrorhodamine 123 存在下,诱导的 HL60 细胞在加入 50 nM PMA 后荧光强度持续增强 [1]

激发波长 (Ex)
525 nm
发射波长 (Em)
488 nm
使用方法

操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)

1. 制备染色液

(1) 配置储存液: 使用 DMSO 溶解 Dihydrorhodamine 123 (DHR 123),配置浓度为 1-10 mM 的储存液。

【注】:未使用的储存液分装后在 -20℃ 或 -80°C 避光保存,避免反复冻融。

(2) 配置工作液: 用合适的缓冲液 (如: 无血清培养基或 PBS) 稀释储存液,配制浓度为 1-10 μM 的工作液。

【注】:请根据实际情况调整工作液浓度,现用现配。

2. 细胞悬浮染色

(1) 悬浮细胞:经 4°C、1000离心 3-5 分钟,弃去上清液,使用 PBS 清洗两次,每次 5 分钟。

(2) 贴壁细胞:使用 PBS 清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经 1000g 离心 3-5 分钟。

(3) 加入 DHR 123 工作溶液重悬细胞,室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。

(4) 孵育结束后,经 1000g 离心 5 分钟,去除上清液,加入 PBS 清洗 2-3 次,每次 5 分钟。

(5) 用预温的无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞术观察。

3. 细胞贴壁染色

(1) 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。

(2) 从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。

(3) 从盖玻片的一角加入100 μL 的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

(4) 室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。

(5) 孵育结束后吸弃染料工作液,使用预温的培养液清洗盖玻片 2~3 次。

4. 显微镜检测:DHR 123 的最大激发/发射波长为 488/525 nm。

 

注意事项:

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

参考文献

[1]. Lydia M. Henderson et al. Dihydrorhodamine 123: a fluorescent probe for superoxide generation. Eur.J.Biochem. 217, 973-980.

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献,确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C) DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响, 请使用新开封的 DMSO)
100 mg/mL (288.70 mM)

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.8870 mL 14.4350 mL 28.8700 mL
5 mM 0.5774 mL 2.8870 mL 5.7740 mL
10 mM 0.2887 mL 1.4435 mL 2.8870 mL
50 mM 0.0577 mL 0.2887 mL 0.5774 mL

备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液。该产品在溶液状态不稳定,建议现配现用,在短期内尽快用完

纯度: 99.72%

1:一般建议:为了使其更好的溶解,请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。
2:运输条件:蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。

4:部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

5: 为更好的适应实验需求和市场情况,SparkJade 部分产品陆续更新中,最新产品信息以官网为准,不便之处,敬请谅解!
6:实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
7: SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。
The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
Animal experiment calculation converter
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。