CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 的有效成分是 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐) ,是一种类似于 MTT (Thiazolyl Blue) 的化合物,它在电子耦合试剂 1-Methoxy PMS 存在条件下,可被线粒体内的脱氢酶还原为橙色甲瓒产物 Formazan (具有高度水溶性) ,而生成的 Formazan 数量与活细胞数量成正比。
✍单一成分蛋白酶抑制剂:
例如大家最熟悉的 PMSF (苯甲基磺酰氟化物) ,它是一种不可逆的抑制剂,专门针对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。PMSF 具有一定的毒性,且在水溶液中的半衰期为 30 min,在细胞裂解过程中很容易失效。
✍复合型蛋白酶抑制剂 (cocktail) :
这类抑制剂是由多种不同机制的抑制剂按照特定比例混合而成,可起到广泛的抑制效果,适应多样化的样本处理需求。
根据成分是否包含 EDTA,复合型 cocktail 可细分为含 EDTA 和不含 EDTA 两种类型。EDTA 能够与金属离子(如 Ca2+,Mg2+,Ni2+等)形成螯合物,有效抑制依赖金属离子的蛋白酶活性。在需要维持金属离子活性的实验中,例如纯化 His 标签蛋白或进行 2D 电泳时,推荐使用不含 EDTA的蛋白酶抑制剂cocktail。
厌氧菌培养关键点在于严格厌氧!快速严格厌氧!
思科捷采用“Vacuum Pumping & Filling” 技术可实现快速严格厌氧,最快仅需1min即可达成氧气浓度低于百万分之五!微需氧环境20秒即可达成!因其优异的算法以及精准的气体控制使得厌氧模式6皿仅需3L混合气体,微需氧仅需1L!远远低于工作站的耗气量。
PCR(polymerase chain reaction)技术称聚合酶链式反应技术,又称无细胞克隆技术,是一种在体外通过DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)扩增特定DNA片段的技术,其主要依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,其原理类似于DNA的天然复制过程。该技术由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
DNA变性(90℃-95℃):双链DNA在高温的作用下氢键断裂,形成单链DNA,以便与引物结合。
退火(50-60℃):温度降低,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合,形成局部双链。
延伸(70-75℃):DNA模板-引物在DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,从引物的5’端至3’端延伸,合成与模板互补的DNA链。
细胞培养是在无菌条件下培养和繁殖生物体的细胞,培养繁殖的基本生理条件:适宜稳定的温度条件、平衡的5%二氧化碳浓度、高饱和湿度、百级洁净的无菌环境。
发表期刊:Journal of Controlled Release
影响因子:10.8
发表单位:南开大学
文献名称:Tumor-penetrating iRGD facilitates penetration of poly (floxuridine-ketal)-based nanomedicine for enhanced pancreatic cancer therapy
产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种革兰氏阳性粗大杆菌,菌体大小为0.9-1.3μm×3.0~9.0μm,无鞭毛、没有运动性,可产生芽胞,芽胞呈椭圆形,位于菌体的次极端。该菌在体内增殖过程中会产生芽胞但体外培养过程不易形成芽胞,通常使用无糖培养基或在不利于细菌生长的条件下进行促芽胞生长。当感染机体时,该菌可以形成明显的荚膜,其荚膜形成能力与菌株毒力、侵袭力呈正相关,根据其产生的特异性毒素,产气荚膜梭菌可以被分为7个型别(A、B、C、D、E、F、G),其不同型别会导致不同的疾病发生。
该菌为一类可以产生H2S等气体的厌氧菌,可在0.1%的氧气浓度下生长,当氧气浓度低于5ppm,有充足养分时,可每八分钟进行一次二分裂。该菌的DNA中的G+C分子含量为24~27%,基因组中含有大量营养相关代谢基因,因此能够利用分解多种糖类,如葡萄糖、麦芽糖、乳糖和蔗糖,并在代谢过程中产生大量的酸和气体,因此在牛乳培养基发酵试验中会产生“汹涌发酵”现象,最适生长温度为37-42℃。由于可产生α、θ毒素,因此在血平板上生长时,可以观察到双层溶血环。在疱肉培养基培养时,可见肉渣转变为略带粉色并伴有大量气体。
蛋白SDS-PAGE凝胶电泳是对蛋白进行定性和半定量分析的一种方法,其工作原理是在施加电场的影响下,不同分子量的蛋白质在筛分基质(凝胶)中的迁移率不同,从而会产生分离。
话不多说,获奖名单公布:
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2024年2季度,思科捷喜报频传,共有60个思科捷产品在新发表的文献中被引用。影响因子共计503.2。
合作单位有山东农业大学,浙江大学,同济大学,苏州大学,中国科学院长春应用化学研究所,天津大学,青岛农业大学,中国海洋大学,南开大学,西北农林科技大学,青岛大学附属医院,山东中医药大学,安徽农业大学,安徽中医药大学,聊城大学,南京农业大学,烟台大学等。
本篇推文,思科捷将对引用思科捷 (Spark Jade) 产品发表文章至 Molecular Plant,Science Bulletin,Advanced Functional Materials 等期刊的 3 篇 IF>15 的文献进行简单介绍,和星博士一起来了解吧。