操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)
储备液的制备
将 1 mg BODIPY 581/591 C11 溶解在 0.1983 mL DMSO 中以获得 10 mM BODIPY 581/591 C11。
1.2 BODIPY 581/591 C11工作液的制备
在无血清细胞培养中稀释储备液培养基或 PBS 取 2-10 μM BODIPY 581/591 C11 工作液。
【注】:请根据实际情况调整 BODIPY 581/591 C11 工作液的浓度。
细胞染色
2.1 细胞制备:
悬浮细胞:4℃,1000g 离心 3-5 分钟,弃上清。PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶解离细胞,制成单细胞悬液。在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟,然后弃去上清液。PBS 洗 2 次,每次 5 分钟。
2.2 加入 1 mL BODIPY 581/591 C11 工作液,室温孵育 30 分钟。
2.3 4℃,400 g 离心 3-4 分钟,弃上清。
2.4 PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。
2.5 用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞,荧光显微镜或流式细胞仪。
注意事项
1. 建议储备液避光保存在 -20℃ 或 -80℃,避免反复冻融周期。
2. 请根据实际情况调整 BODIPY 581/591 C11 工作液的浓度。
3. 本品仅供研发使用,不得用于药物、家庭或其他用途。
4. 为了您的安全和健康,请穿白大褂,戴一次性手套操作。