2',7'-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA) 一种具有细胞渗透性的荧光探针。2',7'-Dichlorofluorescein diacetate 可用于检测活性氧中间体的生成，并用于评估整体氧化应激的毒理学现象。
| 规格 | 价格 | 货期 |
|---|---|---|
| SJ-MD0262-25 mg 25 mg | ¥ 100.00 | |
| SJ-MD0262-50 mg 50 mg | ¥ 160.00 | |
| SJ-MD0262-100 mg 100 mg | ¥ 240.00 | |
| SJ-MD0262-200 mg 200 mg | ¥ 380.00 | |
| SJ-MD0262-500 mg 500 mg | ¥ 720.00 | |
| SJ-MD0262-10 mM * 1 mL in DMSO 10 mM * 1 mL in DMSO | ¥ 160.00 |
| Cas No. |
2044-85-1
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|---|---|---|---|---|---|---|
| 分子式 |
C24H14Cl2O7
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| 分子量 |
485.27
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| 储存方式 (自收到货起) |
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| 储存注意事项 |
粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。 |
| 生物活性 |
2',7'-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA) 一种具有细胞渗透性的荧光探针。2',7'-Dichlorofluorescein diacetate 可用于检测活性氧中间体的生成，并用于评估整体氧化应激的毒理学现象。 |
|---|---|
| 相关靶点 |
Reactive Oxygen Species
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| 作用通路 |
Immunology/Inflammation；Metabolism；NF-κB Signaling |
| 产品类别 |
染料/荧光试剂
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| 激发波长 (Ex) |
496 nm
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| 发射波长 (Em) |
525 nm
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| 参考文献 |
操作指南（以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改) 1. 制备染色液 1.1 配置储存液：使用 DMSO 溶解 2',7'-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA)，配置浓度为 1-10 mM 的储存液。 【注】：未使用的储存液分装后在 -20℃ 或 -80°C 避光保存，避免反复冻融。 1.2 配置工作液：用合适的缓冲液 (如：无血清培养基或 PBS) 稀释储存液，配制浓度为 1-100 μM 的工作液。 【注】：请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。 2. 细胞悬浮染色 2.1 悬浮细胞：经 4°C、1000g 离心 3-5 分钟，弃去上清液，用 PBS 清洗两次，每次 5 分钟。 2.2 贴壁细胞：使用 PBS 清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经 1000g 离心 3-5 分钟。 2.3 加入 DCFH2-DA 工作溶液重悬细胞，室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。 2.4 孵育结束后，经 1000g 离心 5 分钟，去除上清液，加入 PBS 清洗 2-3 次，每次 5 分钟。 2.5 用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞术观察。 3. 细胞贴壁染色 3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 3.2 从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。 3.3 从盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。 3.4 室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。 3.5 孵育结束后吸弃染料工作液，使用预温的培养液清洗盖玻片 2~3 次。 4. 显微镜检测：DCFH2-DA 的最大吸收/发射波长为 492/515 nm。
注意事项： 1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 体外 (25°C） | DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO) |
33.33 mg/mL (68.68 mM) 50℃水浴
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| 制备储备液 | 浓度 溶液体积 质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0607 mL | 10.3035 mL | 20.6071 mL | |
| 5 mM | 0.4121 mL | 2.0607 mL | 4.1214 mL | |
| 10 mM | 0.2061 mL | 1.0304 mL | 2.0607 mL | |
| 50 mM | 0.0412 mL | 0.2061 mL | 0.4121 mL | |
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备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。 |
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操作指南（以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)
1. 制备染色液
1.1 配置储存液：使用 DMSO 溶解 2',7'-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA)，配置浓度为 1-10 mM 的储存液。
【注】：未使用的储存液分装后在 -20℃ 或 -80°C 避光保存，避免反复冻融。
1.2 配置工作液：用合适的缓冲液 (如：无血清培养基或 PBS) 稀释储存液，配制浓度为 1-100 μM 的工作液。
【注】：请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2. 细胞悬浮染色
2.1 悬浮细胞：经 4°C、1000g 离心 3-5 分钟，弃去上清液，用 PBS 清洗两次，每次 5 分钟。
2.2 贴壁细胞：使用 PBS 清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经 1000g 离心 3-5 分钟。
2.3 加入 DCFH2-DA 工作溶液重悬细胞，室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
2.4 孵育结束后，经 1000g 离心 5 分钟，去除上清液，加入 PBS 清洗 2-3 次，每次 5 分钟。
2.5 用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3. 细胞贴壁染色
3.1 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
3.2 从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
3.3 从盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
3.4 室温避光孵育 5-30 分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
3.5 孵育结束后吸弃染料工作液，使用预温的培养液清洗盖玻片 2~3 次。
4. 显微镜检测：DCFH2-DA 的最大吸收/发射波长为 492/515 nm。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。 |
| 2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 3: SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 |
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4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。 |
| 5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！ |
| 6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 |
| 7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 |
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