0E03040101,0E080901,0E020102
D-Luciferin
目录号 : SJ-MD0011B 别名 : D-(-)-Luciferin; Firefly Luciferin; Beetle Luciferin 中文名称 : D-荧光素 促销产品 热销产品 纯度:98.01%

D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当底物荧光素过量时,光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的,使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。在标准荧光计数仪中可以可靠地测量到 0.02 pg 的荧光素酶。除了用于基因表达的外,荧光素酶还用于 ATP 的检测。

CAS No. : 2591-17-5
SparkJade所售产品仅用于科学研究(非临床研究),不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
50 mg ¥  380.00
100 mg ¥  580.00
500 mg ¥  2120.00
1 g ¥  3080.00

SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
2591-17-5
分子式
C11H8N2O3S2
分子量
280.32
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液,避免反复冻融!

 -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

本品保存和操作的过程中粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。另外水溶性储存液过滤除菌后,可以 -20℃ 或 -80℃ 分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气 (防止氧化),稳定性和保存时间更长,长达 1 年。

生物活性

D-Luciferin 是萤火虫萤光素酶 (firefly luciferase) 最常用的底物,在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下通过萤火虫萤光素酶的作用进行氧化脱羧反应发出波长约为 560 nm 的蓝绿色生物萤光 (bioluminescence)。

D-Luciferin 广泛应用于基于萤火虫萤光素酶的报告基因检测,包括表达萤火虫萤光素酶的细胞和组织样品裂解液的检测,以及表达萤火虫萤光素酶动物的活体成像分析 (In Vivo Bioluminescence Imaging) 和培养细胞的体外生物发光分析 (In Vitro Bioluminescence Analysis)。

 

目前市场上有三种产品形式,D-Luciferin (游离酸),D-Luciferin sodium 以及 D-Luciferin Potassium Salt。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-Luciferin (游离酸) 水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如 NaOH 和 KOH 溶液。但钠盐和钾盐形式的 D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

产品类别
天然产物;染料/荧光试剂;生化试剂
体外研究 (In Vitro)

D-luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,它催化萤火虫产生典型的黄绿光。综述涵盖了 D-luciferin 及其衍生物或类似物的合成,这些衍生物或类似物是来自美国萤火虫的荧光素酶的底物或抑制剂,该酶更常用于体外和光学成像技术 [1]

体内研究 (In Vivo)

以萤火虫荧光素酶 (Fluc) 为报告基因,D-Luciferin 为底物的生物发光成像 (BLI) 是目前应用最广泛的技术。将总信号强度与 D-Luciferin 注射后的时间绘制成时间-强度曲线。除了峰值信号,D-Luciferin 注射后的这些固定的时间点 (5、10、15 和 20 分钟) 的也被确定为峰值信号的替代点。将给定时间-强度曲线中的信号归一化为曲线中的峰值信号,以表示 D-Luciferin 注射后的时间变化模式 [2]

使用方法

操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)

1. 注意事项
a) D-荧光素有三种形式,分别为 D-Luciferin (游离酸),D-Luciferin sodium 以及 D-Luciferin Potassium Salt,钠盐和钾盐形式的 D-荧光素易溶于水性缓冲液 (pH 6.1-6.5),储备液可用无 ATP 的水配制,-20℃ 避光保存。游离态须用 DMSO 或者适当的碱中和才能溶解。在较高的 pH 值下,荧光素会在碱催化下形成脱氢荧光素,并外消旋化为 L-异构体。
b) D-荧光素可用于任何现有的报告分析或 ATP 分析系统。
c) 如果测试 ATP,请戴上手套并使用不含 ATP 的容器,以尽量减少所有可能的 ATP 污染源。仅使用无菌的无 ATP 水和试剂。使用高压灭菌水制备所有试剂。

 

2. 实验方案
2.1 体外生物发光图像分析的示例方案
a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。拌匀。立即使用,或一次性分装,-20℃ 保存,避免反复冻融,避免光照。
b) 制备 0.5-1 mM D-Luciferin工作液,预热组织培养基。
c) 从培养的细胞中吸出培养基。
d) 向细胞中加入荧光素工作液,并在成像前于 37℃ 孵育细胞 5-10 分钟。
2.2 体内实验
由于体内实验剂量较大,一般为 150 mg/kg,建议选择钾盐或者钠盐产品。
2.3 荧光素报告基因检测的示例方案
a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。立即使用,或一次性分装,-20℃ 保存,避免反复冻融,避免光照。
b) 配制 1 mM D-Luciferin 工作液和 3 mM ATP,1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 溶于 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8。
c) 将 5-10 μL 细胞裂解物移至微孔板中。使用裂解试剂或不含裂解物的缓冲液作为空白。
d) 根据制造商的说明用荧光素工作溶液灌注发光计。
e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液,积分时间为 10 秒。

参考文献

[1]. Meroni G, et al. D-Luciferin, derivatives and analogues: synthesis and in vitro/in vivo luciferase-catalyzed bioluminescent activity. ARKIVOC 2009 (i) 265-288.

[2].  Inoue Y, et al. Timing of imaging after d-luciferin injection affects the longitudinal assessment of tumor growthusing in vivo bioluminescence imaging. Int J Biomed Imaging. 2010;2010:471408. 

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献,确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C) DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响, 请使用新开封的 DMSO)
9 mg/mL (32.11mM) 50℃水浴

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.5674 mL 17.8368 mL 35.6735 mL
5 mM 0.7135 mL 3.5674 mL 7.1347 mL
10 mM 0.3567 mL 1.7837 mL 3.5674 mL
50 mM 0.0713 mL 0.3567 mL 0.7135 mL

备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。

纯度: 98.01%

1:一般建议:为了使其更好的溶解,请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。
2:运输条件:蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。

4:部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

5: 为更好的适应实验需求和市场情况,SparkJade 部分产品陆续更新中,最新产品信息以官网为准,不便之处,敬请谅解!
6:实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
7: SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

相关产品

The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
Animal experiment calculation converter
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方)
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。