D-Luciferin Potassium Salt 是萤火虫萤光素酶 (firefly luciferase) 最常用的底物，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，通过萤火虫萤光素酶的作用进行氧化脱羧反应发出波长约为 560 nm 的蓝绿色生物萤光 (bioluminescence)。
| 规格 | 价格 | 货期 |
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| 10 mg | ¥ 180.00 | |
| 50 mg | ¥ 300.00 | |
| 100 mg | ¥ 460.00 | |
| 250 mg | ¥ 920.00 | |
| 500 mg | ¥ 1680.00 | |
| 1 g | ¥ 2340.00 | |
| 10 mM * 1 mL in Water | ¥ 460.00 |
| Cas No. |
115144-35-9
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| 分子式 |
C11H7KN2O3S2
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| 分子量 |
318.41
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| 储存方式 (自收到货起) |
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| 储存注意事项 |
本品保存和操作的过程中都要密封、防潮、避光。另外，水溶性储存液过滤除菌后，可以 -20℃ 或 -80℃ 分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气 (防止氧化)，稳定性和保存时间更长。 |
| 生物活性 |
D-Luciferin Potassium Salt 是萤火虫萤光素酶 (firefly luciferase) 最常用的底物，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，通过萤火虫萤光素酶的作用进行氧化脱羧反应发出波长约为 560 nm 的蓝绿色生物萤光 (bioluminescence)。 |
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| 产品类别 |
染料/荧光试剂；生化试剂
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| 体外研究 (In Vitro) |
D-luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物，它催化萤火虫产生典型的黄绿光。与 D-luciferin 及其衍生物或类似物的合成有关的综述中，这些衍生物或类似物是来自美国萤火虫的荧光素酶的底物或抑制剂，该酶更常用于体外和光学成像技术 [1]。 |
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| 体内研究 (In Vivo) |
以萤火虫荧光素酶 (Luc) 为报告基因，D-Luciferin 为底物的生物发光成像 (BLI) 是目前应用最广泛的技术。将总信号强度与 D-Luciferin 注射后的时间绘制成时间-强度曲线。除了峰值信号，D-Luciferin 注射后的这些固定的时间点 (5、10、15 和 20 分钟) 也被确定为峰值信号的替代点。将给定时间-强度曲线中的信号归一化为曲线中的峰值信号，以表示 D-Luciferin 注射后的时间变化模式 [2]。 |
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| 使用方法 |
操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改) 1. 体外生物发光检测 (仅供参考) (1) 用蒸馏水溶解 D-Luciferin Potassium Salt，配制成 100 mM 的储存液 (200×；浓度 30 mg/mL)。混匀后立即使用或分装于 -20℃ 或 -80℃ 冻存，避免反复冻融。 (2) 用预热好的组织培养基 1:200 稀释储存液，配制工作液 (终浓度 150 µg/mL)。 (3) 去除培养细胞的培养基直至无残留。 (4) 待图像分析前，向细胞内添加 1× 荧光素工作液，然后进行图像分析 (或者细胞放在 37℃ 短时间孵育后检测可增强信号)。 2. 活体成像分析（仅供参考） (1) 用无菌的 DPBS ( 不含 Mg2+ 和 Ca2+) 配制 D-Luciferin Potassium Salt 工作液 (15 mg/mL)，0.2 μM 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于 -20℃ 或 -80℃ 冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到 4℃ 解冻，保持冰冷且避光。 (2) 注射量取决于注射方式，具体如下：
(3) 注射入体内 10-20 分钟 (待光信号达到最强稳定平台期)，再进行成像分析。 【注】：注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。 3. 基因检测实验示例（仅供参考） (1) 在无菌水中制备 100 mM 荧光素储备溶液。立即使用，或一次性等份使用，并在 -20℃ 下储存，避免冻融循环，避免暴露在阳光下。 (2) 在 25 mM tricine 缓冲液 (pH 7.8) 中制备含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 的 1 mM D-Luciferin 工作溶液。 (3) 用移液管将 5-10 μL 细胞裂解液移到微孔板中。使用不含裂解物的裂解试剂或缓冲液作为空白对照。 (4) 根据说明，使用荧光素工作溶液为光度计注入底部。 (5) 立即注入 200 μL D-Luciferin 工作溶液，结合时间为 10 秒。 注意事项 a) D-Luciferin 在 100 mM 的水性缓冲液 (pH 6.1-6.5) 中易于溶解。储备溶液可在不含 ATP 的水中制成，并储存在 -20℃ 的温度下，以防光线照射。游离酸必须用适当的碱中和以溶解。在较高的 pH 值下，荧光素经历碱催化的脱氢脲醛生成，以及外消旋成 L-异构体。 |
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| 参考文献 |
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| 体外 (25°C） | DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO) |
3 mg/mL (9.42 mM) 60℃水浴；超声 |
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H2O
(如您选择水作为储备液，请稀释至工作液后， 再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用) |
39 mg/mL (122.48 mM) 50℃水浴
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| 制备储备液 | 浓度 溶液体积 质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.1406 mL | 15.7030 mL | 31.4060 mL | |
| 5 mM | 0.6281 mL | 3.1406 mL | 6.2812 mL | |
| 10 mM | 0.3141 mL | 1.5703 mL | 3.1406 mL | |
| 50 mM | 0.0628 mL | 0.3141 mL | 0.6281 mL | |
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备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。 |
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| 1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。 |
| 2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 3: SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 |
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4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。 |
| 5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！ |
| 6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 |
| 7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 |
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