6-FAM (6-Carboxyfluorescein) 是羧基荧光素的一个同分异构体,主要用于核酸的测序和标记。
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In solvent
建议分装储备液,避免反复冻融!
-20℃,粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。
6-FAM (6-Carboxyfluorescein) 是 5(6)-carboxyfluorescein 的单一异构体衍生物,可以通过羧酸与伯胺的相互作用来荧光标记生物分子 [1]。
操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)
在细胞实验中使用 6-FAM 标记的寡核苷酸探针,主要是通过荧光原位杂交 (FISH) 技术进行。
1. 样本准备:制备鸡胚胎细胞的染色体样品,包括秋水仙碱处理、低渗膨胀和甲醇-冰醋酸固定等步骤。
2. 预处理:染色体经 RNase A、胃蛋白酶及甲醛处理。
3. 杂交:6-FAM 标记的寡核苷酸作为探针溶解于含有大肠杆菌 tRNA 的杂交缓冲液 (50% 甲酰胺,2×SSC,10% 葡聚糖硫酸酯) 中,浓度为 20 ng/μL。DNA 和探针共同变性后,在湿盒中室温过夜杂交。
4. 洗涤与复染:杂交后的载玻片依次在 2×SSC 中清洗三次,再经 70%-96% 的乙醇系列脱水,晾干后用含有 DAPI 的抗淬灭剂封片。
5. 观察与分析:使用适当滤光片的 Leica DM4000B 荧光显微镜观察样品,并利用 QFISH 软件捕捉和处理染色体彩色图像。
[1]. Fischer R, et al. Extending the applicability of carboxyfluorescein in solid-phase synthesis. Bioconjug Chem. 2003 May-Jun;14(3):653-60.
备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。
纯度: 98.64%
4:部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,注:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系SparkJade);
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL Corn oil,混匀澄清。
注意:1. 首先保证母液是澄清的; 2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
技术支持Support@sparkjade.com