Green CMFDA 是一种具有细胞渗透性的荧光探针，放射光为 514 nm，激发光为 485 nm，可作为细胞示踪剂。Green CMFDA 可被活细胞中常见的非特异性酯酶裂解，产生荧光化合物荧光素，在荧光显微镜下可见。
| 规格 | 价格 | 货期 |
|---|---|---|
| 1 mg | ¥ 1950.00 | |
| 5 mg | ¥ 6100.00 |
| Cas No. |
136832-63-8
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| 分子式 |
C25H17ClO7
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| 分子量 |
464.85
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| 储存方式 (自收到货起) |
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| 储存注意事项 |
粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。
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| 生物活性 |
Green CMFDA 是一种具有细胞渗透性的荧光探针，放射光为 514 nm，激发光为 485 nm，可作为细胞示踪剂。Green CMFDA 可被活细胞中常见的非特异性酯酶裂解，产生荧光化合物荧光素，在荧光显微镜下可见。 |
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| 产品类别 |
染料/荧光试剂
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| 激发波长 (Ex) |
485 nm
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| 发射波长 (Em) |
514 nm
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| 使用方法 |
操作指南（以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改) 1. CMFDA 储存液 (10 mM) 的配制 将本品取出回温至室温。用 215.1 µL DMSO 溶解 1 mg CMFDA，充分混匀即得到 10 mM 的储存液。第一次使用时，建议母液现配现用。且溶解后的试剂尽可能在短时间内使用，以保证实验效果。母液遇水极易分解，若单次不能用完，建议分装保存，用封口膜封口，并严格做到≤-20℃密封干燥保存。【避免反复冻融】 ① 本品容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。 ② 所用 DMSO 必须保证高质量，新鲜无水，否则将会导致醋酸酯水解，使荧光染料无法进入细胞，影响实验效果。 ③ 建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、荧光探针的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件。 2. CMFDA 工作液 (0.5-5 µM) 的配制 使用前用无血清培养基稀释上述储存液至工作液浓度 (0.5-25 µM)，并将探针工作液于 37℃ 预热。 3. 染色方法 3.1 悬浮细胞染色 1）离心收集细胞，并吸除上清。用预热的探针工作液轻柔地重悬细胞。 2）于细胞正常生长条件下孵育 15-45 分钟。 3）离心并去除探针工作液。 4）换用新鲜培养基继续培养 30 分钟。 5）清洗细胞，如需固定请参考如下步骤【4. 固定和通透处理】。 3.2 贴壁细胞的染色 1）吸除培养液。 2）轻轻加入预热的探针工作液。 3）于细胞正常生长条件下孵育 15-45 分钟。 4）换用新鲜培养基继续培养 30 分钟。 5）清洗细胞，如需固定，请参考后续步骤【4. 固定和通透处理】。 4. (可选) 固定和通透处理 4.1 固定前，细胞需用 PBS 充分清洗。 【注】：当细胞包被在含有巯基或盖玻片表面上时，该清洗步骤尤为重要。 4.2 用 3.7% 多聚甲醛室温固定细胞 15 分钟。 4.3 固定后于 PBS 中漂洗细胞。 4.4 (可选) 后续如进行其他抗体染色，需对细胞进行通透处理，可将上述处理的细胞于预冷的丙酮中孵育10 min。 5 镜检 将上述处理的细胞用 PBS 漂洗后，进行检测。该探针呈绿色荧光，其 Ex=492 nm，Em=517 nm。 |
| 体外 (25°C） | DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO) |
33.33 mg/mL (71.70 mM)
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| 制备储备液 | 浓度 溶液体积 质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1512 mL | 10.7562 mL | 21.5123 mL | |
| 5 mM | 0.4302 mL | 2.1512 mL | 4.3025 mL | |
| 10 mM | 0.2151 mL | 1.0756 mL | 2.1512 mL | |
| 50 mM | 0.0430 mL | 0.2151 mL | 0.4302 mL | |
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备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。 |
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| 1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。 |
| 2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 3: SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 |
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4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。 |
| 5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！ |
| 6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 |
| 7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 |
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