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动物活体成像

动物活体成像

 

活体成像指在活体状态下在细胞和分子水平上应用影像学方法对生物过程和时间上的定性和定量分析的一门科学,主要包括生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)、同位素成像(Isotopes)、X光成像(X-ray)等。其中,生物发光是荧光素酶基因标记细胞,而荧光技术则采用荧光报告基团表达的荧光蛋白(GFP、EGFP、RFP、YFP)、荧光染料等进行标记,然后利用仪器进行检测。同位素成像是利用放射性同位素作为示踪剂,对研究对象进行标记, 并进行活体成像的一种微量分析方法,通过活体成像技术可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移、感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程,其中以生物发光应用较为实用。

 

生物发光,一般是将 Firefly luciferase 基因(由554个氨基酸构成,约 50 KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活体动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后,当外源(腹腔或静脉注射)给予其底物荧光素 (luciferin ),即可在几分钟内产生发光现象。这种酶在 ATP,氧存在的条件下,催化荧光素的氧化反应才可以发光,因此只有在活细胞内才会产生发光现象,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。

 

除 Firefly Luciferase 外,有时也会用到 Renilla Luciferase。二者的底物不一样,前者的底物是荧光素(D-luciferin),后者的底物是coelentarizine。二者的发光波长不一样,前者所发的光波长在540~600 nm,后者所发的光波长在460~540 nm左右。前者所发的光更容易透过组织,后者在体内的代谢比前者快,而且特异性没有前者好,所以大部分活体实验使用 Firefly Luciferase 作为报告基因,如果需要双标记,也可采用后者作为备选方案。


荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。荧光素在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生发光现象。

动物活体成像相关产品(8)
货号 产品名 中文名称 产品描述
SJ-MD0144 ICG-OSu 吲哚菁绿-活性酯

ICG-OSu (ICG NHS ester) 是一种近红外荧光剂,具有胺反应性,被广泛用于体内成像探针的设计。

SJ-MD0023 Calcein 钙黄绿素

Calcein (Fluorexon) 是一种聚阴离子荧光素衍生物,其荧光基本上与 6.5 到 12 之间的 pH 值无关。这种多功能的绿色荧光团是细胞不可渗透的,通常用于细胞追踪以及可视化如突触小泡融合的细胞过程、间隙连接的研究。

SJ-MD0094 5(6)-FAM 5(6)-羧基荧光素

5(6)-Carboxyfluorescein (5(6)-FAM) 是一种胺反应性 pH 敏感的绿色荧光标记物。5(6)-Carboxyfluorescein 可用于标记蛋白质、多肽和氨基酸。5(6)-Carboxyfluorescein 可用于体内实验肿瘤位置检测。5(6)-Carboxyfluorescein 也可以用作不可固定的极性示踪剂,用于研究融合、裂解和间隙连接通讯,并检测细胞或脂质体体积的变化。

SJ-MD0002 Calcein-AM 钙黄绿素AM

Calcein-AM (Calcein Acetoxymethyl Ester) 是一种可渗透进入细胞、常用于测定真核细胞活力或线粒体通透性转换孔 MPTP (Mitochondrial Permeability Transition Pore) 的绿色荧光探针。Calcein-AM 近年来被广泛应用到细胞活性分析实验中。

本产品以 2 mg/mL (2 mM) 的 DMSO 溶液提供。

SJ-MD0011A D-Luciferin Potassium Salt D-荧光素钾盐

D-Luciferin Potassium Salt 是萤火虫萤光素酶 (firefly luciferase) 最常用的底物,在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下,通过萤火虫萤光素酶的作用进行氧化脱羧反应发出波长约为 560 nm 的蓝绿色生物萤光 (bioluminescence)。

SJ-MD0157 DiR

DiR 是一种长链碳菁染料。DiR 广泛用作亲脂性示踪剂,用于标记细胞、细胞器、脂质体、病毒和脂蛋白。

SJ-MD0012 Coelenterazine 腔肠素

Coelenterazine 是在水生生物中发现的一种发光基团 (luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶 (Renilla reniformis luciferase, Rluc)、分泌型膜锚定荧光素酶 (Gaussia luciferase, Gluc) 和薮枝虫荧光素酶 (Obelia luciferase)。Coelenterazine 也是发光蛋白的构成之一,如水母发光蛋白 (Aequorin)。该产品在溶液状态不稳定,建议现用现配,并在短期内尽快用完

SJ-MD0044 Indocyanine green 吲哚菁绿

Indocyanine green (ICG) 是用于医疗诊断的一种花青染料。Indocyanine green 用于检测心输出量和肝功能,肝血流量以及眼科血管摄影。该产品在溶液状态不稳定,建议现用现配,并在短期内尽快用完。