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Fluo-3 AM
目录号 : SJ-MD0205 别名 : Fluo-3-pentaacetoxymethyl ester;Fluo-3AM 纯度: >98%

Fluo-3 AM 是 Ca2+ 的荧光螯合剂,对钙有很高的亲和性。Fluo-3 AM 可对细胞内钙离子进行特异性识别,具有高灵敏性,对细胞毒性较低,增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内,在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合,产生较强荧光。

CAS No. :121714-22-5
SparkJade所售产品仅用于科学研究(非临床研究),不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
500 μg ¥  2385.00
1 mg ¥  3350.00
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Cas No.
121714-22-5
分子式
C51H50CL2N2O23
分子量
1129.85
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液,避免反复冻融!

 -80℃   2 年
 4℃      2 年  -20℃   1 年
生物活性

Fluo-3 AM 是 Ca2+ 的荧光螯合剂,对钙有很高的亲和性。Fluo-3 AM 可对细胞内钙离子进行特异性识别,具有高灵敏性,对细胞毒性较低,增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内,在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合,产生较强荧光。

Fluo-3 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3,从而被滞留在细胞内,Fluo-3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,最大激发波长为506 nm,最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488 nm左右,发射波长为526 nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

产品类别

染料/荧光试剂

激发波长 (Ex)
526
发射波长 (Em)
488
使用方法

操作指南(以下是我们的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)。

1. Fluo-3 AM 工作液的配制

1.1 制备储存液
用无水 DMSO 稀释 Fluo-3 AM 去配制 10 mM 的储备液。
注:Fluo-3 AM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的 HBSS 稀释储存液,配制成 1-10 μM 的 Fluo-3 AM 工作液。
注:请根据实际情况调整 Fluo-3 AM 工作液浓度,且现用现配。


2. 细胞染色 (悬浮细胞)

2.1 离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在1×106/mL
2.2 加入 1 mL Fluo-3 AM 工作液,室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g,离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

3. 细胞染色 (贴壁细胞)

3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液,用培养基洗 2-3 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜进行观察。

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.8851 mL 4.4254 mL 8.8507 mL
5 mM 0.1770 mL 0.8851 mL 1.7701 mL
10 mM 0.0885 mL 0.4425 mL 0.8851 mL
50 mM 0.0177 mL 0.0885 mL 0.1770 mL

备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。

暂无参考文献!
1:一般建议:为了使其更好的溶解,请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。
2:运输条件:蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。

4:部分产品思科捷仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

5: 为更好的适应实验需求和市场情况,SparkJade 部分产品陆续更新中中,最新产品信息以官网为准,不便之处,敬请谅解!
6:思科捷的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。
The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
Animal experiment calculation converter
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。