Fluo-3 AM 是 Ca2+ 的荧光螯合剂，对钙有很高的亲和性。Fluo-3 AM 可对细胞内钙离子进行特异性识别，具有高灵敏性，对细胞毒性较低，增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内，在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合，产生较强荧光。
| 规格 | 价格 | 货期 |
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| 50 μg | ¥ 700.00 | |
| 2*50 μg | ¥ 1200.00 |
| Cas No. |
121714-22-5
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|---|---|---|---|---|---|---|
| 分子式 |
C51H50Cl2N2O23
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| 分子量 |
1129.85
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| 储存方式 (自收到货起) |
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| 储存注意事项 |
-20℃，粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。 |
| 生物活性 |
Fluo-3 AM 是 Ca2+ 的荧光螯合剂，对钙有很高的亲和性。Fluo-3 AM 可对细胞内钙离子进行特异性识别，具有高灵敏性，对细胞毒性较低，增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内，在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合，产生较强荧光。 Fluo-3 AM 是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留在细胞内， Fluo-3 若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为 506 nm，最大发射波长为 526 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 488 nm 左右，发射波长为 526 nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。 |
|---|---|
| 产品类别 |
染料/荧光试剂
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| 激发波长 (Ex) |
488 nm
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| 发射波长 (Em) |
526 nm
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| 使用方法 |
操作指南（以下是我们的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改）。 1. Fluo-3 AM 工作液的配制 1.1 制备储存液 【注 2】: Fluo-3 AM 工作液制备时，有时需要往 Fluo-3 AM+DMSO 中加入适量的 20% Pluronic F-127 溶液，以增强 AM 探针的水溶性；Pluronic F-127 可以防止 AM 探针在溶液中聚合并促使探针更好进入细胞。但 PluronicF-127 可降低 AM 探针的稳定性，因此只建议在配制工作液时加入，不建议加入储存液长期保存。 2. 细胞染色 (悬浮细胞) 2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×106/mL 【注 】: Fluo-3 AM 染料在大部分细胞中的推荐工作浓度为 4-5 μM，具体使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基础上尽量使用最低探针浓度。 2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。 3. 细胞染色 (贴壁细胞) 3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 |
| 体外 (25°C） | DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO) |
2.5 mg/mL (2.21 mM)
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| 制备储备液 | 浓度 溶液体积 质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 0.8851 mL | 4.4254 mL | 8.8507 mL | |
| 5 mM | 0.1770 mL | 0.8851 mL | 1.7701 mL | |
| 10 mM | 0.0885 mL | 0.4425 mL | 0.8851 mL | |
| 50 mM | 0.0177 mL | 0.0885 mL | 0.1770 mL | |
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备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。 |
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| 1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。 |
| 2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 3: SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 |
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4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。 |
| 5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！ |
| 6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 |
| 7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 |
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