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DiSC3(5)
目录号 : SJ-MD0192 纯度:98.71%

DiSC3(5) 是一种荧光探针,常用作示踪染料来评估线粒体膜电位。DiSC3(5) 对线粒体 NAD 相关呼吸系统有抑制作用,IC50 值为 8 μM。DiSC3(5) 在 Na+/K+-ATP 酶抑制剂 ouabain 2 的存在下可以诱导埃利希腹水肿瘤细胞的膜超极化。

CAS No. :53213-94-8
SparkJade所售产品仅用于科学研究(非临床研究),不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
25 mg ¥  300.00
50 mg ¥  495.00
100 mg ¥  900.00
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Cas No.
53213-94-8
分子式
C25H27IN2S2
分子量
546.53
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液,避免反复冻融!

 -80℃   2 年
 4℃      2 年  -20℃   1 年
储存注意事项

避光,防潮,密封

生物活性

DiSC3(5) 是一种荧光探针,常用作示踪染料来评估线粒体膜电位。DiSC3(5) 对线粒体 NAD 相关呼吸系统有抑制作用,IC50 值为 8 μM。DiSC3(5) 在 Na+/K+-ATP 酶抑制剂 ouabain 2 的存在下可以诱导埃利希腹水肿瘤细胞的膜超极化 [1][2][3]

产品类别

染料/荧光试剂

激发波长 (Ex)
500 nm
发射波长 (Em)
705 nm
使用方法

操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)

1. 制备 DiSC3(5) 染色溶液:

1.1 制备 DMSO 或 EtOH 储备溶液:储备溶液应在 DMSO 或 EtOH 中以 1-5 mM 制备。

【注】:储备溶液的未使用部分应储存在 -20℃。避免反复冻/融循环。

1.2 准备工作溶液:将储备溶液 (步骤 1.1) 稀释到合适的缓冲液中,如无血清培养基 HBSS 或 PBS,制成 1 至 5 μM 的工作溶液。

【注】:对于不同的细胞类型和/或实验条件,应根据经验确定工作溶液的最终浓度。建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。

2. 将细胞染成悬浮液:

2.1 在染料工作溶液中悬浮细胞密度为 1×106/mL (来自步骤 1.2)。

2.2 在 37°C 孵育 2-20 分钟。最佳培养时间取决于细胞类型。首先孵育 20 分钟,然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。

2.3 将标记的悬浮管以 1000-1500 rpm 离心 5 分钟。

2.4 去除上清液,轻轻地将细胞重新悬浮在预热 (37°C) 的生长培养基中。

2.5 按步骤 2.3 和 2.4 洗涤两次。

3. 染色贴壁细胞:

3.1 在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。

3.2 从生长培养基中取出盖玻片,轻轻地排出多余的培养基。将盖玻片放在湿度箱中。

3.3 将 100 μL 染料工作溶液 (来自步骤 1.2) 吸移到盖玻片的角落,轻轻搅拌直至所有细胞都被覆盖。

3.4 将盖玻片在 37°C 孵育 2-20 分钟。最佳培养时间根据细胞类型而变化。开始孵育 20 分钟,然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。

3.5 排出染料工作溶液,用生长培养基清洗盖玻片两到三次。对于每个洗涤循环,用预热的生长培养基覆盖细胞,孵育 5-10 分钟,然后排出培养基。

4. 显微镜检测

5. 流式细胞仪检测:

用 DiSC3(5) 标记的细胞可分别使用常规 FL1、FL2、FL3 和 FL4 流式细胞仪检测通道进行分析。

参考文献

[1]. Yamamoto T, et al. Multiple effects of DiS-C3(5) on mitochondrial structure and function. Eur J Biochem. 2004;271(17):3573-3579.  

[2]. Sims PJ, et al. Studies on the mechanism by which cyanine dyes measure membrane potential in red blood cells and phosphatidylcholine vesicles. Biochemistry. 1974 Jul 30;13(16):3315-30.

[3]. Smith TC, et al. The effect of the fluorescent probe, 3,3'-dipropylthiodicarbocyanine iodide, on the membrane potential of Ehrlich ascites tumor cells. Biochem Biophys Res Commun. 1980 Jul 31;95(2):722-7.

溶解度数据

体外 (25°C) DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响, 请使用新开封的 DMSO)
16.67 mg/mL (30.50 mM)

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.8297 mL 9.1486 mL 18.2973 mL
5 mM 0.3659 mL 1.8297 mL 3.6595 mL
10 mM 0.1830 mL 0.9149 mL 1.8297 mL
50 mM 0.0366 mL 0.1830 mL 0.3659 mL

备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。

纯度: 98.71%

1:一般建议:为了使其更好的溶解,请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。
2:运输条件:蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。

4:部分产品思科捷仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

5: 为更好的适应实验需求和市场情况,SparkJade 部分产品陆续更新中中,最新产品信息以官网为准,不便之处,敬请谅解!
6:思科捷的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。
The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
Animal experiment calculation converter
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。