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  6. 香豆素类染料
7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid
目录号 : SJ-MD0152 中文名称 : 7-氨基-4-甲基-3-香豆素醋酸 纯度：99.29%

7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid 是一种荧光蛋白质标记剂。7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid 在紫外光 (350 nm) 激活时在蓝色区域 (440-460 nm) 发光。

CAS No. : 106562-32-7
SparkJade所售产品仅用于科学研究（非临床研究），不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
50 mg ¥  160.00
100 mg ¥  280.00
400-694-7688 sales@sparkjade.com tech@sparkjade.com

SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
106562-32-7
分子式
C12H11NO4
分子量
233.22
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

  -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存
生物活性

7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid 是一种荧光蛋白质标记剂。7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid 在紫外光 (350 nm) 激活时在蓝色区域 (440-460 nm) 发光。
产品类别
天然产物；荧光/染料
激发波长 (Ex)
344 nm
发射波长 (Em)
454 nm
使用方法

操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)

1. 偶联反应 [1][2]
1.1 蛋白准备：

将待标记蛋白用偶联缓冲液 (0.5 M 硼酸盐，pH 8.5) 稀释至浓度约为 1-10 mg/mL。确保蛋白溶液中不含伯胺 (如 Tris、甘氨酸、铵离子)，以免与 AMCA-NHS 竞争反应。
1.2 染料准备：

在避光条件下，用无水 DMSO 新鲜配制 AMCA-NHS 储存液 (例如 10 mg/mL)。计算所需 AMCA-NHS 的量，通常推荐染料与蛋白的摩尔比在 5:1 至 20:1 之间，以实现适度的标记。
1.3 混合反应：

在持续温和搅拌或翻转混合下，将计算好体积的 AMCA-NHS/DMSO 溶液逐滴加入蛋白溶液中。确保 DMSO 的最终体积占比不超过 5-10%，以防蛋白变性。
1.4 孵育：

将反应混合物在室温 (约 25°C) 下避光孵育 1-2 小时。
2. 纯化与脱盐
2.1 终止反应：

孵育结束后，可加入过量甘氨酸 (终浓度 ~50 mM) 淬灭未反应的染料，但通常直接进行纯化即可。
2.2 去除游离染料：

将反应混合物上样至预先用 PBS 或所需缓冲液平衡好的 Sephadex G-25 或 G-50 凝胶过滤柱。收集先流出的有色蛋白峰 (即AMCA-蛋白偶联物)，弃去后流出的游离染料峰。
2.3 透析：

作为替代或补充步骤，可将反应液对大量 PBS (或其他适用缓冲液) 在 4°C 下透析过夜，以彻底去除小分子杂质和盐离子。
3. 定量分析
使用分光光度计测量纯化后偶联物在 280 nm 和 350 nm 处的吸光度 (A280 和 A350)。
参考文献

[1]. Khalfan H, et al. Aminomethyl coumarin acetic acid: a new fluorescent labelling agent for proteins. Histochem J. 1986;18(9):497-499. 

[2]. Wessendorf MW, et al. A spectrophotometric method for determination of fluorophore-to-protein ratios in conjugates of the blue fluorophore 7-amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid (AMCA). J Histochem Cytochem. 1990;38(1):87-94. 

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献，确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C） DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO)
62 mg/mL (265.84 mM) 50℃水浴；超声

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.2878 mL 21.4390 mL 42.8780 mL
5 mM 0.8576 mL 4.2878 mL 8.5756 mL
10 mM 0.4288 mL 2.1439 mL 4.2878 mL
50 mM 0.0858 mL 0.4288 mL 0.8576 mL

备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。

纯度： 99.29%

SDS
1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。
2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！
6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

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Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
计算 重置
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Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
计算 重置
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
计算 重置
Animal experiment calculation converter
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方）
+
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的；
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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