HA Peptide (TFA) 是一种高度免疫反应的标记,通常用于在中性 pH 条件下从细胞培养上清液和细胞裂解物中分离带有标记的蛋白质。因此,是共免疫沉淀的便利工具,但也可以通过 Western blot 轻松检测到。HA Peptide 很小,因此不太可能干扰融合伙伴蛋白的生物活性和功能。HA Peptide 来自人类流感血凝素 (HA),对应于氨基酸 98-106,并且是一种强免疫反应的表位,使其流行于隔离、纯化、检测和跟踪蛋白质。重组的 HA 标记蛋白可以通过共价固定在树脂上的高度特异性的 anti-HA 单克隆抗体分离。可以通过含 1 mg/mL HA 表位的 TBS 进行温和洗脱方法来洗脱 HA 标记的蛋白质。另外,还有三种化学洗脱选项:0.1 M 甘氨酸 (pH 2-2.8)、3 M NaSCN 或 50 mM NaOH [1]。
在哺乳动物表达载体中编码 N 端 HA Peptide 的核苷酸序列是 T7 启动子驱动的表达在 E. coli 中的一个重要元素,即使没有转录活化的 T7 RNAP 也可以 [2]。
研究结果表明,HA Peptide 被 caspase 3/7 切,HA Peptide 剪切会导致免疫反应的完全丧失。观察结果表明,使用 HA 标记蛋白和构建物研究与细胞死亡相关的凋亡机制可能会产生严重的人为现象 [3]。