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Tetrazolium Red
目录号 : SJ-MD0075 别名 : 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride; TPTZ; TTC 中文名称 : 四氮唑红 促销产品 热销产品 纯度:98.92%

Tetrazolium Red (TPTZ) 是一种不易穿透大脑的无色水溶性染料,主要在活细胞的线粒体中被线粒体酶还原成深红色的,不溶于水的化合物 (甲臜)。Tetrazolium Red 用于观察脱氢酶的活性,暴露于氢气时会由无色变为红色。Tetrazolium Red 能区分中风后存活和坏死的脑组织。Tetrazolium Red 还被用于染色心脏组织,以测量急性损伤的程度,也用于染色脑组织以检测缺血区域的大小。Tetrazolium Red 吸收波长 570 nm。

CAS No. : 298-96-4
SparkJade所售产品仅用于科学研究(非临床研究),不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
5 g ¥  98.00
10 g 咨询

SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
298-96-4
分子式
C19H15ClN4
分子量
334.80
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液,避免反复冻融!

 -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

密封,防潮,粉末避光保存,粉末溶成母液后也需避光保存。

生物活性

Tetrazolium Red (TPTZ) 是一种不易穿透大脑的无色水溶性染料,主要在活细胞的线粒体中被线粒体酶还原成深红色的,不溶于水的化合物 (甲臜)。Tetrazolium Red 用于观察脱氢酶的活性,暴露于氢气时会由无色变为红色。Tetrazolium Red 能区分中风后存活和坏死的脑组织。Tetrazolium Red 还被用于染色心脏组织,以测量急性损伤的程度,也用于染色脑组织以检测缺血区域的大小。Tetrazolium Red 吸收波长 570 nm。

产品类别
染料/荧光试剂
应用领域
心血管
使用方法

操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)

Tetrazolium Red 对缺血区域大小的染色 [1]:

1. 人脐带间充质干细胞 (HUMSCs) 的制备
HUMSCs 从婴儿身上分离出来,并在 37℃ 的 DMEM 中以 10% 的胎牛血清培养。
2. 动物手术
大鼠被氯胺酮麻醉 (400 mg/kg,腹腔注射),进行大脑中动脉闭塞 (MCAO) 手术和再灌注。
注意:在 MCAO 手术中,在右眼眶钻孔以暴露右侧大脑中动脉。动脉在同时夹住两条颈动脉的情况下被结扎 90 分钟,之后移除结扎线和夹子以恢复血流。
3. HUMSCs 的移植
在 MCAO 后 24 小时,通过两次注射将总计 5x105 个 HUMSCs 移植到每只大鼠的缺血皮层中。
4. 缺血皮层的识别
大鼠被深度麻醉并断头。大脑的冠状切片被切成 2 mm 厚,浸泡在 2% Tetrazolium Red 中,然后用 10% 福尔马林固定。
5. 数据分析 (数字图像)
缺血区域的大小,即没有红色染色的区域,使用 ImagePro 软件在数字图像上进行测定。

Tetrazolium Red 染色细胞增殖和活力测量 [2]

1. 准备:2-5 mg/mL Tetrazolium Red 溶于 PBS 中。
2. 用血细胞计数板手动计数分离的细胞,然后将不同浓度 (5x104 到 1x106) 的细胞接种到 24 孔培养板中,加入 1 mL 对照培养基,然后放回温箱中,让细胞再附着在塑料培养板上,培养 24 小时。
3. 第二天,去掉培养基,给细胞添加 1 mL 新培养基,然后每个孔加入 200 mL 的 5 mg/mL Tetrazolium Red,使最终浓度为 0.83 mg/mL Tetrazolium Red。将培养板放回温箱 (37℃) 培养 4 小时。
去掉培养基后,每个孔中加入 1 mL 异丙醇以溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测量光密度。

Tetrazolium Red 对脑损伤以及梗塞区域的大小的染色 [3]

1. 对于脂多糖 (LPS) 敏感的新生儿大脑缺氧缺血 (HI),LPS (0.3 mg/kg) 在缺氧缺血 (HI) 前 72 小时通过腹腔注射给 5 天大的CD1 小鼠。在出生后第 8 天,使用 2% 的 isoflurane 麻醉小鼠,并对右侧颈动脉进行永久结扎。小鼠在此后恢复 1.5 小时,然后在一个含有 10% 氧气和 90% 氮气的玻璃腔室中暴露于 37℃ 的水浴中的缺氧环境下。缺氧暴露后,小鼠被送回动物护理设施与母鼠在一起。体内 Tetrazolium Red 标记程序在恢复 48 小时后进行。

2. 在 37℃ 的磷酸盐缓冲液 (PBS) 中制备的甘露醇 (0.5 M-1.4M) 通过腹腔注射给动物 (约 0.1 mL/g 体重),持续时间从 5 分钟到 180 分钟,以破坏血脑屏障 (BBB)。小鼠用 avertin 麻醉,然后用 PBS 进行心脏灌注,之后灌注 10 mL 的 2% Tetrazolium Red。在心脏灌注 Tetrazolium Red 后 10 分钟,动物的大脑被取出并放入 4% 的多聚甲醛中。提取的大脑还可以在温暖的磷酸盐盐水缓冲液 (PBS) 中孵育 30 分钟,以增强 Tetrazolium Red 染色。将大脑取出并分为对侧 (左侧皮层) 和损伤侧 (右侧皮层) 以进行蛋白质提取。

3. 数据分析 (数字图像):脑损伤以梗塞区域 (白区) 与未受损的对侧半球区域的比例表示。

参考文献

[1]. Lin YC, et al. Human umbilical mesenchymal stem cells promote recovery after ischemic stroke. Stroke. 2011 Jul;42(7):2045-53. 

[2]. Sylvester PW. Optimization of the tetrazolium dye (MTT) colorimetric assay for cellular growth and viability. Methods Mol Biol. 2011;716:157-68. 

[3]. Sun YY, et al. Mannitol-facilitated perfusion staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) for detection of experimental cerebral infarction and biochemical analysis. J Neurosci Methods. 2012 Jan 15;203(1):122-9.

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献,确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C) DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响, 请使用新开封的 DMSO)
67 mg/mL (200.11 mM)
H2O (如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,
再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用)
67 mg/mL (200.11 mM)

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9869 mL 14.9343 mL 29.8686 mL
5 mM 0.5974 mL 2.9869 mL 5.9737 mL
10 mM 0.2987 mL 1.4934 mL 2.9869 mL
50 mM 0.0597 mL 0.2987 mL 0.5974 mL

备注:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效溶液超过 3 个月建议复检,以免影响活性。

纯度: 98.92%

1:一般建议:为了使其更好的溶解,请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。
2:运输条件:蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。

4:部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息,思科捷不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。

5: 为更好的适应实验需求和市场情况,SparkJade 部分产品陆续更新中,最新产品信息以官网为准,不便之处,敬请谅解!
6:实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
7: SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

相关产品

The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
Animal experiment calculation converter
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。