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Tetrazolium Red

目录号 : SJ-MD0075 别名 : 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride; TPTZ; TTC 中文名称 : 四氮唑红 热销产品
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说明书 COA SDS 通用指南
纯度：99.98%

Tetrazolium Red (TPTZ) 是一种不易穿透大脑的无色水溶性染料，主要在活细胞的线粒体中被线粒体酶还原成深红色的，不溶于水的化合物 (甲臜)。Tetrazolium Red 用于观察脱氢酶的活性，暴露于氢气时会由无色变为红色。Tetrazolium Red 能区分中风后存活和坏死的脑组织。Tetrazolium Red 还被用于染色心脏组织，以测量急性损伤的程度，也用于染色脑组织以检测缺血区域的大小。Tetrazolium Red 吸收波长 570 nm。

CAS No. : 298-96-4
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规格 价格 货期
5 g ¥  98.00
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SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
298-96-4
分子式
C19H15ClN4
分子量
334.80
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

  -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

密封，防潮，粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。
生物活性

Tetrazolium Red (TPTZ) 是一种不易穿透大脑的无色水溶性染料，主要在活细胞的线粒体中被线粒体酶还原成深红色的，不溶于水的化合物 (甲臜)。Tetrazolium Red 用于观察脱氢酶的活性，暴露于氢气时会由无色变为红色。Tetrazolium Red 能区分中风后存活和坏死的脑组织。Tetrazolium Red 还被用于染色心脏组织，以测量急性损伤的程度，也用于染色脑组织以检测缺血区域的大小。Tetrazolium Red 吸收波长 570 nm。
产品类别
染料/荧光试剂
应用领域
心血管
使用方法

操作指南（以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)

Tetrazolium Red 对缺血区域大小的染色 [1]:

1. 人脐带间充质干细胞 (HUMSCs) 的制备
HUMSCs 从婴儿身上分离出来，并在 37℃ 的 DMEM 中以 10% 的胎牛血清培养。
2. 动物手术
大鼠被氯胺酮麻醉 (400 mg/kg，腹腔注射)，进行大脑中动脉闭塞 (MCAO) 手术和再灌注。
注意：在 MCAO 手术中，在右眼眶钻孔以暴露右侧大脑中动脉。动脉在同时夹住两条颈动脉的情况下被结扎 90 分钟，之后移除结扎线和夹子以恢复血流。
3. HUMSCs 的移植
在 MCAO 后 24 小时，通过两次注射将总计 5x105 个 HUMSCs 移植到每只大鼠的缺血皮层中。
4. 缺血皮层的识别
大鼠被深度麻醉并断头。大脑的冠状切片被切成 2 mm 厚，浸泡在 2% Tetrazolium Red 中，然后用 10% 福尔马林固定。
5. 数据分析 (数字图像)
缺血区域的大小，即没有红色染色的区域，使用 ImagePro 软件在数字图像上进行测定。

Tetrazolium Red 染色细胞增殖和活力测量 [2]：

1. 准备：2-5 mg/mL Tetrazolium Red 溶于 PBS 中。
2. 用血细胞计数板手动计数分离的细胞，然后将不同浓度 (5x104 到 1x106) 的细胞接种到 24 孔培养板中，加入 1 mL 对照培养基，然后放回温箱中，让细胞再附着在塑料培养板上，培养 24 小时。
3. 第二天，去掉培养基，给细胞添加 1 mL 新培养基，然后每个孔加入 200 mL 的 5 mg/mL Tetrazolium Red，使最终浓度为 0.83 mg/mL Tetrazolium Red。将培养板放回温箱 (37℃) 培养 4 小时。
去掉培养基后，每个孔中加入 1 mL 异丙醇以溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测量光密度。
参考文献

[1]. Lin YC, et al. Human umbilical mesenchymal stem cells promote recovery after ischemic stroke. Stroke. 2011 Jul;42(7):2045-53. 

[2]. Sylvester PW. Optimization of the tetrazolium dye (MTT) colorimetric assay for cellular growth and viability. Methods Mol Biol. 2011;716:157-68. 

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献，确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C） DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO)

67 mg/mL (200.12 mM) 产品如有少量不溶解，可过滤后使用。
H2O (如您选择水作为储备液，请稀释至工作液后，
再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用)

67 mg/mL (200.12 mM) 产品如有少量不溶解，可过滤后使用。

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9869 mL 14.9343 mL 29.8686 mL
5 mM 0.5974 mL 2.9869 mL 5.9737 mL
10 mM 0.2987 mL 1.4934 mL 2.9869 mL
50 mM 0.0597 mL 0.2987 mL 0.5974 mL

备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。

纯度： 98.92%

SDS
1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。
2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！
6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
计算 重置
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
计算 重置
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
计算 重置
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第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方）
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计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的；
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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