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DSS Crosslinker
目录号 : SJ-MX3237 别名 : Disuccinimidyl suberate 中文名称 : 双琥珀酰亚胺辛二酸酯 热销产品 纯度：≥98%

DSS Crosslinker 是一种胺反应性双功能蛋白交联剂，也是一种不可裂解的ADC linker，可用于抗体药物偶联药物 (ADCs) 的合成。

CAS No. : 68528-80-3
SparkJade所售产品仅用于科学研究（非临床研究），不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
100 mg ¥  145.00
500 mg ¥  400.00
1 g ¥  620.00
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SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
68528-80-3
分子式
C16H20N2O8
分子量
368.34
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

  -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
生物活性

DSS Crosslinker 是一种胺反应性双功能蛋白交联剂，也是一种不可裂解的ADC linker，可用于抗体药物偶联药物 (ADCs) 的合成。
相关靶点
ADC Linkers
产品类别
ADC 相关分子
应用领域
肿瘤
体外研究 (In Vitro)

ADC 由抗体组成，抗体通过 ADC 连接体与 ADC 细胞毒素相连 [1]。
使用方法

操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)

蛋白质交联方案
1. 实验材料：
1.1 无水 DMSO 或 DMF，用于溶解 DSS Crosslinker
1.2 反应缓冲液：使用 pH 为 7 ~ 9 的非胺类缓冲液，如 100 mM 磷酸钠，0.15M NaCl；20 mM HEPES；100 mM 碳酸盐/碳酸氢盐；或 50mM 硼酸盐。
1.3 淬火缓冲液：1M Tris•HCl， pH7.5 (可加入1M甘氨酸或赖氨酸) 通过透析或凝胶去除未反应的试剂。
2. 操作步骤：
2.1 在反应缓冲液中制备蛋白质溶液。
2.2 使用前准备交联剂。将 DSS Crosslinker 溶于 DMSO 或 DMF 中。称量 2 mg Disuccinimidyl Suberate 交联剂于微量离心管中，加入 216 μL 溶剂，使成终浓度为 25 mM。
2.3 在蛋白质样品中加入交联剂。如果蛋白质浓度大于 5 mg/mL，使用 10 倍摩尔过量的交联剂。对于样品浓度小于 5 mg/mL，使用 20- 50 倍摩尔过量的交联剂。建议使用终浓度为 0.25-5 mM 的交联剂。
2.4 将反应混合物在室温下孵育 30 分钟或在冰上孵育 2 小时。
2.5 加入淬灭缓冲液淬灭反应，终浓度为 20~50 mM Tris，或通过透析/脱盐除去未反应的试剂。
2.6 将淬火反应在室温下孵育 15 分钟。

细胞内和细胞外交联反应

交联反应可以在悬浮细胞或培养板上的贴壁细胞上进行。在培养板上时，交联反应主要发生在暴露的细胞表面。因此，交联前，必须充分冲洗细胞表面以去除培养基，否则含胺成分会使反应猝灭。使用浓度高的细胞悬浮液交联效率较高，因为反应中只需添加较少的交联试剂。一般情况下，1-5 mM 的终浓度的交联试剂是有效的。随着 pH 值的增加，NHS 反应速度加快。因此，下面的例子中 pH 为8.0，以便快速完成反应。
1. 所需材料：
1.1 交联剂溶液：在使用前，将 DSS Crosslinker 溶解在干燥的 DMSO 中，使成 10-25 mM。
1.2 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)： 20 mM 磷酸钠，0.15 M NaCl，pH 值为 8。或使用 pH 7～9 的 HEPES，碳酸氢盐/碳酸盐/硼酸盐缓冲液替代。
1.3 猝灭溶液:1M Tris, pH 7.5 (Tris或甘氨酸将猝灭反应)。
2. 操作步骤：
2.1 将细胞悬浮在 PBS (pH 8.0) 中，约为 25×10-6 细胞/mL。
2.2 用冰冷的 PBS (pH 8.0) 洗涤细胞三次，去除含胺的培养基和蛋白质。对于细胞表面相互作用的研究，在细胞中加入配体，在 4℃ 下孵育 1 小时。
2.3 加入 DSS Crosslinker 溶液至终浓度为 1-5 mM。
2.4 将反应混合物在室温下孵育 30 分钟。
2.5 加入猝灭溶液至终浓度为 10-20 mM Tris，淬灭反应。
2.6 淬灭反应在室温下进行 15 分钟。
【注意】：
1. DSS Crosslinker 对湿度敏感。为了避免湿气凝结到产品上，在打开前必须将小瓶平衡到室温。
2. NHS -酯部分易水解，因此不要制备储存液，实验前现配现用。
3. 交联具有生物活性的蛋白质 (如酶、抗体等) 在偶联时可能导致活性损失，这可能是由分子构象变化引起的。当交联剂修饰结合底物或抗原中涉及的赖氨酸基团时，也可能发生活性损失。调整试剂与目标物的摩尔比可以改善活性损失。或者使用靶向不同官能团的交联剂。
4. NHS 酯的水解是一个竞争性反应，随着ph值的增加而加快。在稀释的蛋白质或肽溶液中更容易发生水解。在浓蛋白溶液中，酰化反应更容易发生。
参考文献

[1]. Beck A, et al. Strategies and challenges for the next generation of antibody-drug conjugates. Nat Rev Drug Discov. 2017 May;16(5):315-337.  

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献，确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C） DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO)
74 mg/mL (200.9 mM) 50℃水浴

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.7149 mL 13.5744 mL 27.1488 mL
5 mM 0.5430 mL 2.7149 mL 5.4298 mL
10 mM 0.2715 mL 1.3574 mL 2.7149 mL
50 mM 0.0543 mL 0.2715 mL 0.5430 mL

备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。

纯度： ≥98%

SDS
1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。
2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！
6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

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Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
计算 重置
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
计算 重置
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
计算 重置
Animal experiment calculation converter
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方）
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计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的；
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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