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HPF
目录号 : SJ-MD0109 别名 : Hydroxyphenyl Fluorescein; 3'-p-(Hydroxyphenyl) fluorescein 中文名称 : 羟苯基荧光素 热销产品 纯度：98.09%

HPF (Hydroxyphenyl Fluorescein) 是一种稳定的 ROS 荧光探针染料，比 H2DCFDA 的特异性与稳定性强。HPF 通过羟基自由基，与细胞内过氧亚硝基反应，可产生强烈的绿色荧光。HPF 可应用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标仪或流式细胞仪。

CAS No. : 359010-69-8
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规格 价格 货期
500 μg ¥  1860.00
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Cas No.
359010-69-8
分子式
C26H16O6
分子量
424.40
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

  -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。
生物活性

HPF (Hydroxyphenyl Fluorescein) 是一种稳定的 ROS 荧光探针染料，比 H2DCFDA 的特异性与稳定性强。HPF 通过羟基自由基，与细胞内过氧亚硝基反应，可产生强烈的绿色荧光。HPF 可应用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标仪或流式细胞仪。

有许多荧光试剂，例如 2,7-二氯二氢荧光素 (DCDHF)，可用于检测自由基，但是它们容易被光氧化以及许多非自由基氧化剂 (例如过氧化氢) 氧化，因此存在很大的局限性。而 HPF 仅被高活性氧 (hROS) 氧化，例如氢氧自由基，过氧亚硝酸盐和过氧化物酶/ H2O2 系统产生的  hROS。该化合物对其他活性氧 (ROS)，例如次氯酸盐，单线态氧，超氧化物，过氧化氢，一氧化氮和烷基过氧化物几乎没有活性。

HPF 本身没有荧光，当与 hROS (如羟基自由基和过亚硝酸盐) 反应被氧化后，HPF 转换为高荧光分子荧光素，激发/发射最大值分别为 490/515 nm。
相关靶点
Reactive Oxygen Species
作用通路
NF-κB Signaling；Immunology/Inflammation；Metabolism
产品类别
染料/荧光试剂
体外研究 (In Vitro)

HPF 是一种细胞可渗透的，光稳定的羟苯基荧光素，可作为检测高活性氧 (hROS) 的高度灵敏的荧光探针 [1]。

由于 HPF 不会与一氧化氮，超氧化物和过氧化氢反应，因此可以与一氧化氮和超氧化物区分开来检测亚硝酸盐。由于 HPF 不与次氯酸盐 (-OCl) 反应，因此可以与检测 -OCl 的 APF (氨基苯基荧光素) 结合使用 [2]。
体内研究 (In Vivo)

在 IR (电离辐射) 前 20 分钟，给药小鼠腹腔内注射 HPF 探针 (15 μl，25 μM)。通过 HPF 氧化形式发出的荧光信号来评估 •OH 的积累 [3]。
激发波长 (Ex)
490 nm
发射波长 (Em)
515 nm
使用方法

操作指南（以下是SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改）

HPF 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 10 mM 的 HPF。
【注】：HPF 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 HPF 工作液。
【注】：请根据实际情况调整 HPF 工作液浓度，且现用现配。

细胞染色
2.1 准备工作
悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
2.2 加入 1 mL HPF 工作液，室温孵育 15 分钟。
2.3 400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测。
参考文献

[1]. Kobayashi H, et al. New strategies for fluorescent probe design in medical diagnostic imaging. Chem Rev. 2010;110(5):2620–2640.

[2]. Setsukinai K, et al. Development of novel fluorescence probes that can reliably detect reactive oxygen species and distinguish specific species. J Biol Chem. 2003 Jan 31;278(5):3170-5.

[3]. Yunhai Chuai, et al. Hydrogen-rich saline attenuates radiation-induced male germ cell loss in mice through reducing hydroxyl radicals. Biochem J. 2012 Feb 15;442(1):49-56.

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献，确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C） DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO)
125 mg/mL (294.53 mM)

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3563 mL 11.7813 mL 23.5627 mL
5 mM 0.4713 mL 2.3563 mL 4.7125 mL
10 mM 0.2356 mL 1.1781 mL 2.3563 mL
50 mM 0.0471 mL 0.2356 mL 0.4713 mL

备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。

纯度： ＞98%

SDS
1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。
2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！
6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

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The molarity calculator equation
Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
计算 重置
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
计算 重置
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
计算 重置
Animal experiment calculation converter
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方）
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的；
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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