Filipin III 是 Filipin 的主要成分，Filipin 是一种 28-元环五烯大环内酯类抗真菌抗生素，由 S. filipinensis、S. avermitilis 和 S. miharaensis 产生。Filipin III 可以与膜甾醇相互作用导致膜结构的改变。Filipin III 是一种广泛用于胆固醇在膜上定位的荧光探针。
| 规格 | 价格 | 货期 |
|---|---|---|
| 500 μg | ¥ 1800.00 | |
| 1 mg | ¥ 3000.00 |
| Cas No. |
480-49-9
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|---|---|---|---|---|---|
| 分子式 |
C35H58O11
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| 分子量 |
654.83
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| 储存方式 (自收到货起) |
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| 储存注意事项 |
氮气保存，粉末溶成母液后需避光保存。 |
| 生物活性 |
Filipin III 是 Filipin 的主要成分，Filipin 是一种 28-元环五烯大环内酯类抗真菌抗生素，由 S. filipinensis、S. avermitilis 和 S. miharaensis 产生。Filipin III 可以与膜甾醇相互作用导致膜结构的改变。Filipin III 是一种广泛用于胆固醇在膜上定位的荧光探针。 |
|---|---|
| 相关靶点 |
Fungal；Antibiotic
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| 作用通路 |
Anti-infection
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| 产品类别 |
天然产物；抗生素
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| 应用领域 |
免疫/炎症
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| IC50 & Target |
Fungal [1] |
| 体外研究 (In Vitro) |
由于 Filipin III 的荧光和结合胆固醇的能力，该化合物已被用于通过冷冻断裂电子显微镜和通过结合后 Filipin III 的荧光下降来检测膜中的胆固醇 [2]。 胆固醇既是细胞膜的重要结构成分，也是激素和胆汁酸生物合成的早期中间体。因此，在细胞中定位和测量胆固醇非常重要。菲洛平 (Filipin) 是从 S. filipinensis 培养物中分离出来的四种同分异构体多烯大环内酯的集合名称；Filipin III 是主要同分异构体，也是大多数研究所使用的一种 [2][3]。 Filipin III 已在双染色操作中作为探针，用于检测聚丙烯酰胺凝胶中的脂蛋白并将其固定在硝酸纤维素膜上。它还广泛用于通过特定的荧光复合物对未酯化的胆固醇进行定位和定量 [4]。 在 C 型 Niemann-Pick 病的研究中，Filipin III 在临床上用作游离胆固醇的染色剂 [4]。 Filipin III 抑制朊病毒蛋白 (PrP) 的内吞作用导致 PrP 从质膜释放 [5]。 Filipin III 被发现可在烟草细胞中引发信号反应，包括 NADPH 氧化酶依赖性产生 [6]。 通过 Filipin III 染色和胆固醇含量检测，发现小鼠和人类肿瘤组织及从这些组织中分离出来的肿瘤细胞和小鼠 T 淋巴瘤细胞系的胆固醇水平显著增高 [7]。 |
| 使用方法 |
操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)
1. 制备染色液 1.1 配置储存液：将低温保存的固体室温平衡至少 20 分钟。对管子进行离心，将粉末集中在管底。使用无水 DMSO 或无水乙醇溶解 Filipin III，配置浓度为 1-10 mM 的储存液。 【注】：Filipin III 溶液对光和空气都非常敏感，建议将配置好的储存液进行分装，在 -80°C 避光保存，避免反复冻融。 1.2 配置工作液：使用合适的缓冲液 (如：PBS、HBSS 或其他生理缓冲液) 稀释储存液，配制浓度为 1-250 μM 的工作液。 【注】：请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。 2. 细胞染色 2.1 吸弃培养基，使用 PBS 清洗细胞 2-3 次。 2.2 使用 4% 多聚甲醛固定细胞，室温固定 15-20 分钟。 2.3 固定完成后，使用 PBS 清洗 2-3 次，每次 5 分钟。 2.4 向培养孔中加入 Filipin III 工作液，需完全覆盖住细胞，室温避光孵育 30 分钟-2 小时。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求及染色效果自行调整。 2.5 孵育结束后吸弃染料工作液，使用 PBS 清洗 2~3 次。 3. 组织切片染色 (冰冻切片)： 3.1 将切片放置在通风处，室温晾干 20-30 分钟。 3.2 使用 4% 多聚甲醛浸没切片，室温固定 30 分钟。 3.3 小心吸弃固定液，使用 PBS 清洗切片 2-3 次，每次 5 分钟。 3.4 向切片上滴加 Filipin III 工作液，需完全覆盖住切片，室温避光孵育 30 分钟-2 小时。请根据实际情况调整染色方案。 3.5 孵育结束后吸弃染料工作液，使用 PBS 清洗 2~3 次。 3.6 如需封片，建议使用水性荧光封固剂。 4. 显微镜检测：Filipin III 的激发光范围是 340-380 nm，发射光范围是 385-470 nm。 注意事项： 1、Filipin III 与胆固醇的亲和力非常高结合，但 Filipin III 具有快速光漂白的特点，建议染色后立即观察。 2、Filipin III 溶液对光和空气都非常敏感。条件允许的话，配置好的溶液分装冻存，且充入情性气体，-80°C 分装冻存，避免反复冻融。 3、Filipin III 在紫外激发下仅产生适度的自然荧光，与其他荧光探针相比荧光强度较弱，在使用共聚焦显微镜观察时需要注意这点。 4、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 参考文献 |
[5]. Marella, M. et al., Filipin Prevents Pathological Prion Protein Accumulation by Reducing Endocytosis and Inducing Cellular PrP Release. J. Biol. Chem., 277(28), 25457-25464(2002). |
| 体外 (25°C） | DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO) |
10 mg/mL (15.27 mM)
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| 制备储备液 | 浓度 溶液体积 质量 | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5271 mL | 7.6356 mL | 15.2711 mL | |
| 5 mM | 0.3054 mL | 1.5271 mL | 3.0542 mL | |
| 10 mM | 0.1527 mL | 0.7636 mL | 1.5271 mL | |
| 50 mM | 0.0305 mL | 0.1527 mL | 0.3054 mL | |
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备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。 |
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[5]. Marella, M. et al., Filipin Prevents Pathological Prion Protein Accumulation by Reducing Endocytosis and Inducing Cellular PrP Release. J. Biol. Chem., 277(28), 25457-25464(2002).
[6]. Bonneau, L. et al., Plasma membrane sterol complexation, generated by filipin, triggers signaling responses in tobacco cells. Biochim. Biophys. Acta, 1798(11), 2150-2159(2010).
| 1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。 |
| 2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 3: SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。 |
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4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。 |
| 5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！ |
| 6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 |
| 7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 |
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