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H2DCFDA
目录号 : SJ-MD0047 别名 : DCFH-DA; 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate 中文名称 : 2', 7'-二氯荧光素二乙酸酯 热销产品 纯度：98.47%

H2DCFDA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH，而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF。检测 DCF 的荧光就可以知道细胞内 reactive oxygen species (ROS) 的水平。DCF 的荧光光谱和 FITC 非常相似，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱，荧光颜色为黄-绿色。

CAS No. : 4091-99-0
SparkJade所售产品仅用于科学研究（非临床研究），不向任何个人提供产品和服务。
规格 价格 货期
50 mg ¥  260.00
100 mg ¥  500.00
250 mg ¥  800.00
500 mg ¥  1120.00
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SparkJade小分子产品文献引用

Cas No.
4091-99-0
分子式
C24H16Cl2O7
分子量
487.29
储存方式
(自收到货起)
 Pure form  -20℃   3 年

 In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

  -80℃   6 个月
 -20℃   1 个月
储存注意事项

-20℃，粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。
生物活性

H2DCFDA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH，而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF。检测 DCF 的荧光就可以知道细胞内 reactive oxygen species (ROS) 的水平。DCF 的荧光光谱和 FITC 非常相似，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱，荧光颜色为黄-绿色。
相关靶点
Reactive Oxygen Species
作用通路

Immunology/Inflammation；Metabolism；NF-κB Signaling
产品类别
染料/荧光试剂
应用领域
干细胞
体外研究 (In Vitro)

通过流式细胞术分析 H2DCFDA 探针氧化表明，difESCs 中 ROS 的基础水平比胚胎干细胞 (ESC) 大约 6-7 倍。H2DCFDA 和 DCFDA 探针都以其初始形式是非荧光的，但它们在细胞内经历多步转化，导致荧光产物二氯荧光素 (DCF) 的形成。这两种探针之间的唯一区别是 H2DCFDA 的转化涉及氧化。因此，与 DCFDA 探针相关的荧光相反，H2DCFDA 处理的细胞的荧光取决于细胞内 ROS 水平 。
激发波长 (Ex)
492 nm
发射波长 (Em)
517 nm
使用方法

操作指南 (以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)

1.1 制备储存液
用 无水 DMSO 配制 5 mM 的 H2DCFDA 储备液。
【注】：H2DCFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 H2DCFDA工作液。
【注】：请根据实际情况调整 H2DCFDA 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106 /mL。
2.2 加入 1 mL 染料 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行 观察。
【注】：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。

溶解度数据【动物实验需要先查阅文献，确认是否需要添加合适比例助溶剂来帮助溶解】

体外 (25°C） DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响， 请使用新开封的 DMSO)
125 mg/mL (256.52 mM)

制备储备液

制备储备液 浓度 溶液体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0522 mL 10.2608 mL 20.5217 mL
5 mM 0.4104 mL 2.0522 mL 4.1043 mL
10 mM 0.2052 mL 1.0261 mL 2.0522 mL
50 mM 0.0410 mL 0.2052 mL 0.4104 mL

备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。

纯度： 98.43%

SDS
暂无参考文献！
1：一般建议：为了使其更好的溶解，请用 37℃ 加热试管并在超声波、水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。
2：运输条件：蓝冰运输或根据您的需求运输。
3:  SparkJade 小分子产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

4：部分产品 SparkJade 仅能提供部分信息，思科捷不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
5: 为更好的适应实验需求和市场情况，SparkJade 部分产品陆续更新中，最新产品信息以官网为准，不便之处，敬请谅解！
6：实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
7： SparkJade 的所有产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

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Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)
计算 重置
The dilution calculator equation
Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)
This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2
计算 重置
Molecular weight calculator
Enter the chemical formula of the compound to calculate its molar mass and elemental composition
g/mol
计算 重置
Animal experiment calculation converter
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系SparkJade为您提供正确的澄清溶液配方）
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的；
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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