H2DCFDA - CAS:4091-99-0 - 山东思科捷生物技术有限公司

010F05,0D05,0E0301010C

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H2DCFDA

目录号 : SJ-MD0047 别名 : DCFH-DA; 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate 中文名称 : 2', 7'-二氯荧光素二乙酸酯 纯度：98.43%

H2DCFDA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH，而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF。检测 DCF 的荧光就可以知道细胞内 reactive oxygen species (ROS) 的水平。DCF 的荧光光谱和 FITC 非常相似，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱，荧光颜色为黄-绿色。

CAS No. :4091-99-0

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规格	价格	货期
50 mg	¥ 290.00
100 mg	¥ 540.00
200 mg	咨询
500 mg	咨询
大包装	有超大折扣	QQ交谈

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Cas No.

4091-99-0

分子式

C₂₄H₁₆Cl₂O₇

分子量

487.29

储存方式
(自收到货起)

Pure form

-20℃ 3 年

In solvent

建议分装储备液，避免反复冻融！

-80℃ 2 年

4℃ 2 年

-20℃ 1 年

储存注意事项

-20℃，避光

生物活性	H2DCFDA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH，而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的 DCFH 生成有荧光的 DCF。检测 DCF 的荧光就可以知道细胞内 reactive oxygen species (ROS) 的水平。DCF 的荧光光谱和 FITC 非常相似，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱，荧光颜色为黄-绿色。
相关靶点	Reactive Oxygen Species
作用通路	Immunology/Inflammation；Metabolic Enzyme/Protease；NF-κB Signaling
应用领域	干细胞
体外研究 (In Vitro)	通过流式细胞术分析 H2DCFDA 探针氧化表明，difESCs 中 ROS 的基础水平比胚胎干细胞 (ESC) 大约 6-7 倍。H2DCFDA 和 DCFDA 探针都以其初始形式是非荧光的，但它们在细胞内经历多步转化，导致荧光产物二氯荧光素 (DCF) 的形成。这两种探针之间的唯一区别是 H2DCFDA 的转化涉及氧化。因此，与 DCFDA 探针相关的荧光相反，H2DCFDA 处理的细胞的荧光取决于细胞内 ROS 水平^[1]。
激发波长 (Ex)	492 nm
发射波长 (Em)	517 nm
使用方法	操作指南 (以下是SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改) 1. H2DCFDA 溶于 DMSO 中，得到 10 mM 的原液，使用前进一步稀释。 2. 用 5 μM H2DCFDA 溶液在 PBS 中 37°C 黑暗孵育 30 分钟，然后用 0.05% 胰酶-EDTA 溶液收集，悬浮在新鲜培养基中，立即用流式细胞仪分析。 3. 如果需要，与 H2DCFDA 探针一起使用荧光素染料 DCFDA 的 ROS 不敏感修饰。染色方法与 H2DCFDA 相同 ^[1]。
参考文献	[1]. Lyublinskaya OG, et al. Redox environment in stem and differentiated cells: A quantitative approach. Redox Biol. 2017 Aug;12:758-769.

溶解度数据

体外 (25°C）	DMSO (吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)	97 mg/mL (199.06 mM)

制备储备液

制备储备液	浓度溶液体积质量	1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.0522 mL	10.2608 mL	20.5217 mL
	5 mM	0.4104 mL	2.0522 mL	4.1043 mL
	10 mM	0.2052 mL	1.0261 mL	2.0522 mL
	50 mM	0.0410 mL	0.2052 mL	0.4104 mL
备注：请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。溶液超过 3 个月建议复检，以免影响活性。