实时荧光定量PCR，Real-time Quantitative PCR(qPCR)，是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪，实时监控反应过程的技术。随着PCR反应的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。实时荧光定量PCR 技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。

SYBR Green I染料法和TaqMan法“傻傻”分不清，别急星博士来手把手教学啦！

什么是荧光染料？让星博士给你介绍一下吧：

荧光染料，指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料可以单独使用，也可以组合成复合荧光染料使用。

荧光染料灵敏度高，特异性强，易于操作，且生物相容性较好故可用于活体成像，因此在细胞标记，多种检测分析，药物分布和代谢研究，及体内成像中均有较好的应用前景。

石蜡切片是观察样本组织结构常用的方法，切片厚度能达4-6μm，其所需时间短，简便易行，样品经石蜡包埋后能长期保存。石蜡切片步骤包括取材→固定→脱水透明→浸蜡→包埋→切片，每一步都影响最终的成片结果。

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Western Blot常见3种检测方法优缺点及如何选择？

蛋白质印迹（Western Blot, WB）又称为免疫印迹（Immunoblot），是利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）将样品中分子量大小不同的蛋白分开，然后通过电转移的方法将凝胶中的蛋白转移到固相膜上，再利用抗原、抗体的特异性结合反应，特殊的抗体标记技术以及相应的检测方法，进而对目的蛋白进行定性、相对定量检测的技术。

蛋白质印迹（Western Blot, WB）

又称为免疫印迹（Immunoblot），是利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）将样品中分子量大小不同的蛋白分开，然后通过电转移的方法将凝胶中的蛋白转移到固相膜上，再利用抗原、抗体的特异性结合反应，特殊的抗体标记技术以及相应的检测方法，进而对目的蛋白进行定性、相对定量检测的技术。