操作指南(以下是 SparkJade 的推荐方案。本方案仅提供指导原则,请根据您的具体实验进行修改)
1. DAPI dihydrochloride 工作液的制备
1.1 储备液的制备
将 1 mg DAPI dihydrochloride 溶解于 1 mL ddH2O 以获得 1 mg/mL 的储备液。
注意:建议将储备液储存在 -20°C 或 -80°C 避光条件下,避免反复冻融。
1.2 DAPI dihydrochloride 工作液的制备
用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,得到 1-10 μg/mL 的工作液。
注意:请根据需要调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度
2. 细胞染色
2.1 悬浮细胞 (96 孔板)
a.在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟,然后弃去上清液。PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。细胞密度为 1×106/mL。
b.加入 1 mL 工作液,室温孵育 3-10 分钟。
c.4℃、400 g 离心 3-4 分钟,弃上清。
d.用 PBS 洗涤 2 次,每次 5 分钟。
e.用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2.2 贴壁细胞
a. 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
b. 从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
c. 加入100 μL 工作液,轻摇使之完全覆盖细胞,室温孵育 3-10 分钟。
d. 用培养基洗涤 2 次,每次 5 分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。
保存
-20℃,1 年。避光
注意事项
1. 请根据实际情况调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度。
2. 本品仅供 R&D 使用,不用于药物、家庭或其他用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿白大褂,戴一次性手套操作。