采用两种不同的方法评估 AZD-8055 对 mTOR 的抑制活性。使用截短的重组 mTOR 酶，AZD8055 的 IC50=0.13±0.05 nM。从HeLa细胞中提取天然 mTOR 酶复合物，IC50=0.8±0.2 nM。AZD-8055 对所有I类 PI3K 亚型和 PI3K 样激酶家族的其他成员表现出优异的选择性（约1000倍）。AZD-8055抑制 mTORC1 底物 p70S6K 和 4E-BP1 的磷酸化以及 mTORC2 底物 AKT 和下游蛋白的磷酸化。在 MDA-MB-468 细胞中，AZD8055 对 pAKT Ser ⁴⁷³ 的 IC50s=24±9 nM（n=13），对 pS6 Ser ^235/236 的 IC50s=27±3 nM（n=12）^[1]。

AZD8055 有效抑制 U87MG，A549 和 H838 细胞增殖， IC50分别为 53，50 和 20 nM。AZD8055 作用于 H838 和 A549 细胞，也诱导自体吞噬和增加LC3-II 水平 ^[1]。

AZD8055 降低白血病细胞增殖和细胞周期进展, 降低白血病祖细胞的无性系生长，且在白血病细胞中诱导 caspase 依赖的细胞凋亡，但是作用于正常未成熟的CD34⁺ 细胞时不会产生这种诱导作用 ^[2]。

在携带U87-MG（PTEN缺失）胶质母细胞瘤异种移植瘤的小鼠中，AZD-8055 口服治疗产生了剂量依赖性的肿瘤生长抑制作用，分别为每日2次，每次2.5、5和10 mg/kg，抑制率分别为33%、48%和77%。在荷瘤裸鼠中观察到类似的剂量依赖性：2.5、5和10 mg/kg/d，每天两次，肿瘤生长抑制率分别为44%、55%和93%。AZD8055 每日2次（10 mg/kg）或每日2次（20 mg/kg）给药也可显著抑制乳腺、肺、结肠、前列腺和子宫异种移植模型的肿瘤生长和消退 ^[1]。

AZD8055 显著降低体内 mTOR 及其底物的磷酸化水平和小胶质细胞的活化，促进小胶质细胞由M1表型向M2表型极化。此外，在蛛网膜下腔出血（SAH）后给予 AZD8055 显著改善 EBI，包括神经元凋亡、神经元坏死、脑水肿和血脑屏障通透性 ^[3]。

细胞系：U87MG，A549，和H838 细胞

培养时间：72-96小时

方法：将细胞暴露于越来越浓的 AZD-8055（0-1280 nM）中 72-96 小时，并对细胞核（0.03 mg/mL Hoechst 33342）和酸性囊泡（1 μg/mL 吖啶橙）进行染色。在ArrayScan II平台上以 450 和 536 nm波长捕捉图像，并对酸性囊泡的百分比和细胞的数量进行量化。为了评估 LC3，在用 AZD8055 孵育之前，将细胞暴露在 E64d/pepstatin（10 μg/mL）中 30-90分钟。细胞在冰上裂解并通过免疫印迹法进行分析 ^[1]。

将肿瘤细胞（U87-MG为10⁶个，A549为5×10⁶个）按0.1 mL的体积注入，当肿瘤大小达到 0.2 cm³时，将小鼠随机分为对照组和治疗组。

AZD-8055通过口服灌胃（0.1 mL/10 g体重）给予每日1次或2次。对照组只接收赋形药。在研究期间，每周两次记录肿瘤体积（用卡尺测量）、动物体重和肿瘤情况。计算肿瘤体积 ^[1]。